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遗传标记技术DNA的短串联重复序列位点检测有哪些
作者:实验室法医 来源:DNA亲子鉴定中心 日期:2016-12-05 10:15
目前最常用于DNA亲子鉴定的一种技术遗传标记叫做STR,即短片段重复序列。STR系统又名微卫星序列,为广泛分布于不同染色体上的一些简单序列(多为2-6 bp)重复排列而成,每个个体同一等位基因上这种序列重复次数不同,故序列长度不同,呈多态性。易于PCR(DNA体外扩增技术)扩增,特别适用于法医物证、个人识别和亲子鉴定。
一、STR-PCR的原理:
STR(短片重复序列),不同的人表现的重复次数也不同,选取多个这种标记,其组合就更不一样。根据测算,只有在万亿个人当中,这种组合序列才能有相同的两个人,可以说这种概率基本为零。根据这个规律,我们就可以对不同的人进行有效识别了。当然,双胞胎的STR完全一致,因为他们的遗传物质是完全一样的。
在遗传的过程中,父亲和母亲各将自己的一半DNA遗传给孩子,孩子的DNA中有一半是父亲的,一半是母亲的。在亲子鉴定的过程中,对于孩子的每一个STR的重复,都应该含有一半父亲的重复次数。同时检测孩子和父亲的STR重复,就可以判断父亲和孩子是否具有亲子关系。
二、STR-PCR的鉴定方法:
DNA是从收集的材料中比如几滴血,腮细胞或培养的组织内提取而来。用畴素将DNA样本切成小段,放进喱胶内,用电泳槽推动DNA小块使之分离--最细的在最远,最大的最近。之后,分离开的基因放在尼龙薄膜上,使用特别的DNA探针去寻找基因,相同的基因会凝聚于一起,然后,利用特别的染料,在X光的环境下,便显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。小孩这种肉眼可见的条码很特别--一半与母亲的吻合,一半与父亲的吻合。这过程重覆几次,每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码,用几组不同的探针,可得到超过99.9%的父系分辨率。方法:10名白血病患者在移植前和移植后1、3、5、7、9、11、14、30 d采用STR检测的方法,并分析其检测结果。结果其中7名患者STR基因位点检测,从最初的供者基因嵌合状态到30 d最后1次检测,都是完全独立植入。另外3名患者嵌合状态从最初为零到无法检出,均有GVHD的发生。结论 STR基因位点检测反应供者基因植入的情况,提示患者复发和GVHD的发生,对临床早期诊断和治疗有一定的指导意义。
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